食品微生物檢驗培養基質量要求及評價標準
發布時間：
2022-11-16
作者：
日水生物培養基公司
食品微生物檢驗培養基質量要求及評價標準的探討
申鷹李雨鑫林筑黃坤寧王艷嬌龔會琴
貴州省分析測試研究院(貴陽550002)
貴州省流通環節食品安全檢驗中心(貴陽550002)
摘要:食品微生物學檢驗標準的制修訂對進一步規范食品微生物檢驗、提高食品微生物檢驗的準確性和可靠性,都具有十分重要的作用.本文結合工作實踐,研究探討了《食品微生物學檢驗培養基和試劑的質量要求》新舊標準的差異、培養基及試劑的質量、質控菌株的保藏及使用等方面的問題.
關鍵詞:培養基;試劑;質量要求;評價標準
中圖分類號:TS207文獻標識碼:A文章編號:1672-5026(2014)06-090-04
Discussion on the media quality requirements and evaluation standards for food microbiology testing
食品安全監管及檢測是保障人民群眾“舌尖上的安全”的一項重點工作,為了使食品安全檢測工作更好的為食品安全監管服務,各項食品安全檢測標準都在不斷的清理和改進中.GB/T4789.28-2003《食品衛生微生物學檢驗染色法、培養基和試劑》只介紹了微生物檢驗中常用的幾種染色法的方法和步驟,同時對培養基和試劑的配制方法和步驟進行了具體的要求,并沒有在培養基的質量控制和評判標準方面提出系統全面的要求,以致各檢測單位采用的培養基的質量控制標準不一致.因此,GB/T4789.28一2003的修訂就顯得尤為關鍵.根據《中華人民共和國食品安全法》和《食品安全國家標準管理辦法》規定,經食品安全國家標準審評委員會審查通過2014年6月1日起實施標準GB4789.28一2013《食品微生物學檢驗培養基和試劑的質量要求》并代替GB/T4789.28一2003,新的標準對食品安全微生物檢測培養基和試劑的質量控制及評判標準做出了詳細的規定,為做好食品安全微生物檢測培養基和試劑的質量保證和性能測試提供了檢測依據,為保證食品安全微生物檢測把好第一關打下堅實的基礎
新舊標準的差異
2013年12月6日,國家衛生和計劃生育委員會發布了2013年第13號公告,共發布了75項食品安全國家標準.其中涉及食品微生物學檢驗(GB4789系列)標準5個,并定格為食品安全國家標準
新發布實施的GB4789.28-2013與舊版GB/T4789.28-2003相比,具有以下的差異:
修改了標準的名稱和年號
新標準由以往的推薦性標準修改為強制性標準(標準號從GB/T修改為GB),中文名稱也相應的增加了“食品安全國家標準”.同時,頒布的單位由原來衛生部和國標委聯合頒布,改為由國家衛生和計劃生育委員會獨立頒布
刪除了培養基和試制的配方、配制方法和微生物染色法
原標準GB/T4789.28-2003中對微生物染色法進行了介紹,并規定了食品微生物檢測中用到的各種培養基的成分和制備方法.GB4789.28-2013中則去掉了微生物染色法這一部分內容,同時也不再強調各種培養基成分和制備方法的要求
增加了培養基和試制的質量控制方法和指標
GB4789.28-2013中增加了各種奧型的培養基及試劑的質量保證、實驗室制備培養基應該注意的問題和實驗室培養基性能測試的方法及判定標準.新標準對培養基和試削進行了詳細的分類,并對每一類培養基和試劑的質量控制進行了詳細的介紹.使相關技術人員能清晰的了解食品微生物學栓驗所用的培養基分類及培養基的質量控制和性能測試方法
增加了培養基的不正確配制出現的質量問題及原因分析
新標準增加了培養基的不正確配制出現的質量.問題及原因分析,對于微生物實驗培暴基制備中經常遇到的問題如:培養基不能凝固、pH不正確,顏色異常,產生沉淀、培券基出現抑制或低生長率、選擇性差、污染等具體情況進行了原因分析,以便相關實驗人員在培養基配制中遇到奧似問題時可以對癥下藥的查找和分析問題的原因.為正確制備培養基提供參考依據和指導
培養基及試劑的質量保證
我國的培養基生產廠家眾多,培養基種類繁多,雖然很多生產廠家和使用者也有自己的質量控制標準,但是新標準GB4789.28-2013沒有發布實施之前,沒有一個系統全面的國家標準控制培養基的質量,從而導致各種廠家生產的培養基質量參差不齊,對很多微生物學實驗結果產生了不同程度的影響.因此,培養基質量控制在微生物檢驗中就顯得尤為重要[1-0.培養基質量控制方法分為理化試驗方法和微生物學試驗方法,其中理化試驗方法包括pH值的測定、凝膠強度的測定等,微生物學試驗方法分為固體和液體培養基的定量和半定量及定性試驗[”.新標準GB4789.28-2013中就培養基的質量保證從不同的幾個方面做出了相關的規定.生產企業提供的證明性文件和產品的交貨驗收、貯存.培養基的實驗室制備、培養基的使用、培養基的棄置等,這就使培養基的質量控制從生產商的產品供應到實驗宣制備、產品使用、產品銷毀等各方面和各環節過程得到很好的控制,并使培養基的潮源有據可依
質控菌株的保藏及使用
實驗室的測試菌橡不僅是微生物檢驗中的標準菌種成參照標本,同時也是進行培養基和試劑的性能測試的微生物,因此測試菌株的正確保藏和便用培養基和試劑的性能測試的一個關鍵環節.不同菌株的保藏和使用,很大程度上受到保藏方法的影響,因此,應該根據各菌株的特性選擇相應的保藏方法.如凍干保藏.利用多孔磁珠在一70C保藏、使用液氮保藏或其他有效的保藏方法等
制備儲存菌株時,應注意避免標準鍺存藺株的交叉污染和(或)退化,應先將標準儲存菌株制成菌懸液.再轉接到非選擇性培養基中培養.從而獲得特性穩定的菌株.對于商業來源的菌株,應按照制造商的說明嚴格執行.儲存菌株不應用來制備標準儲存菌株或標準菌株
新標準附錄B還給實驗人員簡單明了的展示了從標準菌株制備標準儲備菌株、工作菌株等的工作流程團.為測試菌株的正確保藏和使用提供保證
培養基和試劑的質量要求
微生物學實驗室的主要工作是對各種微生物進行保存、復蘇、培養、檢測和(或)計數,所用的培養基應該對樣品和被測微生物都具有特異性.因此,微生物檢驗過程要求培養基符合標準或者滿足最低性能要求,并保證能夠獲得重現性結果,這樣才能使分析結果準確、可靠
原標準GB/T4789.28一2003中并未對培養基和試劑的質量要求作出具體的規定,但是在CNAS-CL09檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領域的應用說明中提出了實驗室應建立和保持有效的適合試驗范圍的培養基(試劑)質量控制程序.該程序應該包括對培養基(試劑)進行評估的方式和儲存的規定、接受/拒收的標準等;對自備的和商業提供的培養基(試劑)都需要評估;根據培養基(試劑)的性質和實驗類型,對培養基(試劑)的可用性進行評估.實驗室應該使用符合要求的培養基.對微生物檢測中起關鍵作用的培養基必須采取技術性驗收,但是在GB4789.28--2013還未正式發布實施之前并沒有具體的標準方法和依據對培養基進行有效的質量控制和評價.對培養基進行有效的質量控制和評價,從而保證實驗室結果的可靠性和有效性是微生物學實驗室質量控制程序的一個必要組成部分,新標準GB4789.28一2013中提出了培養基質量控制要求和培養基的性能測試方法,為培養基的性能測定提供了依據,從根本上保證了培養基的質量.筆者對新標準GB4789.28-2013進行了仔細研讀,該標準在培養基和試劑質量要求部分對實驗室使用的商品化和非商品化的培養基均進行詳細的分類,并對每一類培養基和試劑的微生物學要求和性能測試方法作出了詳細規定.實驗室使用的培養基的分類、質量控制指標和方法詳見
表１生產商和實驗室自制的培養基和試劑的質量控制的測試方法
表２實驗室使用商品化培養基和試劑的質量控制的測試方法
培養基和試劑的質量好壞,直接影響到很多微生物學實驗的結果,新標準GB4789.28-2013中對食品微生物檢測培養基和試劑的質量控制作出了.一個系統全面的要求,對控制培養基的質量起到了很好的指導作用,使培養基的質量控制從生產商的產品供應到實驗室制備、產品使用、產品銷毀等各方面和各環節過程得到很好的控制,并使培養基的溯源有據可依.同時,認真學習,深入理解并嚴格實施該標準的要求對提高食品微生物檢測結果的準確性和可靠性具有很重要的作用
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