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    1. 關于青島日水培養基質控報告改版的通知

      發布時間:

      2022-11-16

      作者:

      培養皿培養基


        青島日水培養基質控報告將于2014年1月1日起改為最新排版,相應文件請到公司網站的下載版塊下載。

        特此通知。

        青島日水生物技術有限公司

       

      GB 4789.41-2016食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 腸桿菌科檢驗

       

      部分內容如下:

      附 錄 B
      培養基和試劑
      B. 1  緩沖蛋白胨水( BPW )
      B. 1. 1  成分
      蛋白胨 10.
      0g
      氯化鈉
      5. 0g
      磷酸氫二鈉
      3. 5g
      磷酸二氫鉀
      1. 5g
      蒸餾水
      1000. 0mL
      B. 1. 2  制法
      將 B.
      1. 1 成分加熱溶解,于 25℃ 時調節
      pH
      至 7.
      2±0. 2 ,分裝于 500mL 廣口瓶中,每瓶 225mL ,
      121℃ 高壓滅菌 15min 。
      B. 2  緩沖葡萄糖煌綠膽鹽肉湯( EE 肉湯)
      B. 2. 1  成分
      蛋白胨
      10. 0g
      葡萄糖
      5. 0g
      磷酸氫二鈉(無水)
      6. 45g
      磷酸二氫鉀
      2. 0g
      牛膽鹽
      20. 0g
      煌綠
      0. 0135g
      蒸餾水
      1000. 0mL
      B. 2. 2  制法
      將 B.
      2. 1 成分溶于水中,加熱煮沸至完全溶解,加熱不宜超過 30min ,迅速冷卻培養基,于 25℃ 調
      pH
      至 7.
      2±0. 2 ,分裝于滅菌的 18mm×180mm 試管中,每管 10mL ,不需高壓滅菌, 5℃±3℃ 可存
      放一個月。
      B. 3. 1  成分
      蛋白胨
      7. 0g
      酵母浸膏
      3. 0g
      3 號膽鹽 1. 5g
      葡萄糖
      10. 0g
      氯化鈉
      5. 0g
      GB4789. 41 — 2016
      10
      中性紅
      0. 03g (或 0. 6% 酒精溶液 5mL )
      結晶紫
      0. 002g (或 0. 1% 水溶液 2mL )
      瓊脂粉
      10. 0g~12. 0g
      蒸餾水
      1000. 0mL
      B. 3. 2  制法
      將 B.
      3. 1 成分溶于水中,加熱煮沸至完全溶解, 25℃ 時調節
      pH
      至 7.
      4±0. 2 ,分裝于滅菌的錐形燒
      瓶中,不需高壓滅菌,用前制備。傾注平板,使用前干燥平板。未干燥的平板 5℃±3℃ 可存放兩周。
      B. 4  營養瓊脂( NA )
      B. 4. 1  成分
      牛肉浸膏
      3. 0g
      蛋白胨
      5. 0g
      瓊脂粉
      10. 0g~12. 0g
      蒸餾水
      1000. 0mL
      B. 4. 2  制法
      將 B.
      4. 1 成分溶于水中,加熱煮沸, 25℃ 時調節
      pH
      至 7.
      3±0. 2 , 121 ℃ 高壓滅菌 15min 。傾注平
      板,使用前干燥平板。未干燥的平板于 5℃±3℃ 可存放兩周。
      B. 5  葡萄糖瓊脂
      B. 5. 1  成分
      胰蛋白胨
      10. 0g
      酵母浸膏
      1. 5g
      葡萄糖
      10. 0g
      氯化鈉
      5. 0g
      溴甲酚紫
      0. 015g (或 0. 4% 溴甲酚紫酒精溶液 3. 75mL )
      瓊脂粉
      10. 0g~12. 0g
      蒸餾水
      1000. 0mL
      B. 5. 2  制法
      將 B.
      5. 1 成分溶于水中,加熱煮沸, 25℃ 時調節
      pH
      至 7.
      0±0. 2 ,分裝于 15mm×150mm 試管,每
      管約 5mL ,
      121℃ 高壓滅菌 15min 后,試管垂直放置。于 5℃±3℃ 可存放 1 周。為去除培養基中的
      氧氣,使用前可將葡萄糖瓊脂試管置于沸水浴中 15min ,然后迅速冷卻,備用。
      B. 6  革蘭氏染色液
      B. 6. 1  結晶紫染色液
      B. 6. 1. 1  成分
      結晶紫
      1. 0g
      GB4789. 41 — 2016
      11
      95% 乙醇 20. 0mL
      1% 草酸銨水溶液 80. 0mL
      B. 6. 1. 2  制法
      將結晶紫完全溶解于乙醇中,然后與草酸銨溶液混合。
      B. 6. 2  革蘭氏碘液
      B. 6. 2. 1  成分
      1. 0g
      碘化鉀
      2. 0g
      蒸餾水
      300. 0mL
      B. 6. 2. 2  制法
      將碘和碘化鉀先行混合,加入少許蒸餾水充分振搖,待完全溶解后,再加蒸餾水至 300mL 。
      B. 6. 3  沙黃復染液
      B. 6. 3. 1  成分
      沙黃
      0. 25g
      95% 乙醇 10. 0mL
      蒸餾水
      90. 0mL
      B. 6. 3. 2  制法
      將沙黃溶解于乙醇中,然后用蒸餾水稀釋。
      B. 6. 4  染色方法
      B. 6. 4. 1  將涂片在火焰上固定,滴加結晶紫染色液,染 1min ,水洗。
      B. 6. 4. 2  滴加革蘭氏碘液,作用 1min ,水洗。
      B. 6. 4. 3  滴加 95% 乙醇脫色 15s~30s ,直至染色液被洗掉,但不要過分脫色、水洗。
      B. 6. 4. 4  加沙黃復染液,復染 1min ,水洗、干燥、鏡檢。
      B. 6. 4. 5  革蘭氏陽性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。
      B. 7  氧化酶試劑
      B. 7. 1  成分
      N , N , N' , N' - 四甲基對苯二胺鹽酸鹽 1. 0g
      蒸餾水
      100. 0mL
      B. 7. 2  制法
      將 B.
      7. 1 成分溶解于冷水中,少量新鮮配制。
      B. 7. 3  試驗方法
      用細玻璃棒或一次性接種針挑去單個菌落,涂布在氧化酶試劑濕潤的濾紙上。在 10s 內呈現粉紅
      GB4789. 41 — 2016
      12
      或紫紅色,即為氧化酶試驗陽性。不變色者為氧化酶試驗陰性。
      B. 8  無菌 1mol
      / LNaOH
      B. 8. 1  成分
      NaOH 40. 0g
      蒸餾水
      1000. 0mL
      B. 8. 2  制法
      稱取 40g 氫氧化鈉溶于 1000mL 蒸餾水中,
      121℃ 高壓滅菌 15min 。
      B. 9  無菌 1mol
      / LHCl
      B. 9. 1  成分
      HCl 90. 0mL
      蒸餾水
      1000. 0mL
      B. 9. 2  制法
      移取濃鹽酸 90mL ,用蒸餾水稀釋至 1000mL ,
      121℃ 高壓滅菌 15min 。
      暫無數據

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