大腸桿菌IMVC生化鑒定套裝
發布時間：
2022-11-16
作者：
配置好的生物培養基 日水生物
大腸桿菌IMVC生化鑒定套裝（GB、SN）
（含2支緩沖蛋白胨水、1支蛋白胨水、1支Korser氏檸檬酸鹽肉湯）
用來測定菌的生理生化特征的4個實驗:
I吲哚試驗
M:甲基紅試驗
V:V.P試驗
C:檸檬酸實驗
1.吲哚試驗:（1）原理：一些細菌（如大腸埃希菌、變形桿菌、霍亂弧菌等）能分解培養基中的色氨酸生成吲哚(靛基質)，經與試劑中的對二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈紅色，則為吲哚試驗陽性。
2.（2）方法：將試驗菌用蛋白胨水培養基30~35℃培養24小時滴加吲哚試劑2~4滴呈玫瑰紅的為陽性不變色的為陰性。
3.MR-VP試驗包括甲基紅試驗和VP試驗。
A.甲基紅試驗
(1)原理:一些細菌能分解葡萄糖產生丙酮酸，丙酮酸進一步代謝分解為乳酸、甲酸、乙酸，使培養基的pH下降到4.5 以下，加入甲基紅指示劑即顯紅色(甲基紅變紅的范圍為pH4.4~6.0) ; 某些細菌雖能分解葡萄糖，但產酸量少，培養基的pH 在6.2 以上，加入甲基紅指示劑呈黃色。
(2) 方法: 將待檢菌接種至葡萄糖蛋白陳水培養基中， 30~35℃ 培養24h，加入甲基紅試劑2 滴， 立即觀察結果。
(3) 結果判斷: 紅色者為陽性，黃色者為陰性。
VP ( Voges-Proskaurer) 試驗
(1)原理: 某些細菌能分解葡萄糖產生丙酮酸，并進一步將丙酮酸脫羧成為乙酰甲基甲醇，后者在堿性環境中被空氣中的氧氧化成為二乙酰，進而與培養基中的精氨酸等所含的胍基結合，形成紅色的化合物，即VP試驗陽性。
(2) 方法: 將待檢菌接種至葡萄糖蛋白臟水培養基中，30~35℃培養24h，加入VP 試劑 甲液6滴-乙液2滴，混勻后30~35℃培養30 min ，觀察結果紅色者為陽性，陰性結果常呈灰色、白色或無色。有些細菌可能會出現反應遲緩的情況，滴加試劑后若為陰性，應于培養中繼續培養4小時，4小時內未變紅者判為陰性。
4.檸檬酸實驗
（1）原理：有的細菌如產氣桿菌，能利用檸檬酸鈉為碳源，因此能在檸檬酸鹽培養基上生長，并分解檸檬酸鹽后產生碳酸鹽，使培養基變為堿性。此時培養基中的溴麝香草酚藍指示劑由綠色變為深藍色。不能利用檸檬酸鹽為碳源的細菌，在該培養基上不生長，培養基不變色。
（2）方法：將試驗菌培養在檸檬酸鹽培養基斜面上37℃培養24h觀察有無細菌生長與培養基顏色變化如果含有溴麝香草酚藍的斜面藍色者為陽性，反應呈綠色的為陰性，反應含苯酚紅的斜面如果呈紅色為陽性，反應呈黃色為陰性反應。